NOVUS: pSIVA, kit de detecção de Apoptose

February 8, 2019

O pSIVA (Polarity Sensitive Indicator of Viability), é um sistema baseado no reconhecimento da fosfatidilserina (phosphatidylserine – PS), que se transloca da região citoplasmática da membrana para a região extracelular logo no início do processo de apoptose e é um evento irreversível. Este sistema se utiliza de uma sonda baseada na Anexina XII que pode ser utilizado tanto em Citometria de Fluxo quanto em microscopia e possui diversas vantagens sobre os sistemas baseados na Anexina V:

 

- Fluorescência dependente de PS: em solução, a sonda não emite fluorescência alguma, apenas quando ligado à PS.

 

- Ligação reversível: eventos celulares que regularizam a homeostasia ou recuperam a célula de morte celular fazem com que a PS volte para a parte intracelular da membrana, inativando a sonda e consequentemente, cessando a fluorescência.

 

- Vantagens do pSIVA sobre a Anexina V: ambos os sistemas não são tóxicos e detectam a exposição de PS, entretanto, o pSIVA não requer etapa de lavagem, detecta PS irreversível ou transiente, permite imagem de células vivas e em tempo real, e visualização em sistema in vivo.

 

 

Microscopia de Células Vivas: Kit de Microscopia pSIVA [NBP2-29382]
– Análise quantitativa da fluorescência de pSIVA-IANBD™ em culturas neuronais de recuperadas ou privadas de NGF. A fluorescência de pSIVA-IANBD™ de 3 áreas da cultura mostra que a recuperação com NGF de células que estavam morrendo (A) é associada com a perda de fluorescência, enquanto as células que não foram recuperadas, continuam a emitir fluorescência.

 

Microscopia de Células Vivas: Kit de Microscopia pSIVA [NBP2-29382]
– Recuperação de neurônios que estavam morrendo. Retirada de NGF induz morte celular e emissão de fluorescência pelo pSIVA-IANBD™. A correlação entre fluorescência e microscopia de fase mostra que NGF foi capaz de recuperar os neurônios, conforme observado pela perda da fluorescência de pSIVA-IANBD™ e, 30h de incubação.

 

Citometria de Fluxo: pSIVA-IANBD™ [NBP2-29611]
- pSIVA-IANBD™ + PI mostra a marcação progressiva da população celular à medida que estas se movem de um estado de homeostasia em direção à morte celular.

 

 

 

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